Vaskulitdiagnostiken har förändrats med tiden och nu används i första hand antigenspecifika tester för PR3 och MPO istället för den traditionella detektionen av ANCA med indirekt immunofluorescens (IIF). I det här fallet har de nya metoderna visat sig vara bättre helt enkelt. ANCA med IIF finns kvar men görs betydligt mer sällan nu och i allmänhet med andra frågeställningar, t.ex. inflammatorisk tarmsjukdom.
PR3 och MPO detekteras med ELISA eller liknande metoder (ALBIA/Luminex, ImmunoCap). En metaanalys av ett stort antal studier som har undersökt träffsäkerhet för ELISA-metoderna avseende vaskulit-subtyperna GPA och MPA publicerades 2022. Resultaten sammanfattas så här:
| GPA | MPA | |
| PR3 | 74% | 11% |
| MPO | 7% | 73% |
I samma metaanalys uppskattades specificiteten för både PR3 och MPO (avseende båda vaskulit-fenotyperna) var likvärdig och i genomsnitt 97%.
ANCA
Autoantikroppar mot cytoplasmatiska antigen i neutrofila granulocyter (ANCA) detekteras traditionellt med IIF, på liknande sätt som ANA. För ANCA görs IIF med humana neutrofila granulocyter istället för cellinjen HEp-2. Patientens serum tillsätts som vanligt och eventuella IgG-antikroppar detekteras med en sekundär antikropp konjugerad med en fluorescerande molekyl.
Två typiska cytoplasmatiska mönster kan urskiljas och rapporteras som positiva fynd: cytoplasmatisk (cANCA) och perinukleär (pANCA). Mönstret cANCA utgörs oftast av autoantikroppar riktade mot proteinas 3 (PR3). Vid pANCA förekommer autoantikroppar riktade mot några olika antigen men det som är tydligast kopplat till vaskulit är myeloperoxidas (MPO).
cANCA och anti-PR3 är associerade med småkärlsvaskuliten granulomatös polyangit (GPA, f.d. Wegeners syndrom) men undantag finns. pANCA, särskilt när den orsakas av anti-MPO, är associerat med mikroskopisk polyangit (MPA). Den tredje småkärlsvaskuliten i sammanhanget, eosinofil granulomatos med polyangit (EGPA, f.d. Churg-Strauss syndrom), är oftast ANCA-negativ men i 30% av fallen detekteras ANCA som oftast utgörs av anti-MPO.
Även anti-nukleära antikroppar (ANA) framtråder på ANCA-glasen och gör det svårt att tolka eventuell perinukleär fluorescens (pANCA). Att se och tolka cANCA brukar gå bra även med serumprov med ANA-reaktivitet. Tänk på att ANA som syns på ANCA-glas eller med någon annan IIF-metod inte är detsamma som att patienten har postiv ANA eftersom gränsen för vilken signalstyrka som räknas som positiv ANA är metodberoende.
Litteratur
Walker BS, et al. Performance of MPO-ANCA and PR3-ANCA immunoassays for the stratification of specific ANCA-associated vasculitis: A systematic review and meta-analysis. Autoimmun Rev. 2022 Jun;21(6):103100. doi: 10.1016/j.autrev.2022.103100.